Browsing by Author "Khedidja"

Filter results by typing the first few letters
Now showing 1 - 1 of 1
  • No Thumbnail Available
    Item
    Production et activité biologique de toxines de Bordetella pertussis
    (2024-12-14) Tahar Djebbar; Khedidja
    Bordetella pertussis est l’agent responsable de la coqueluche, c’est une bactérie Gram négative caractérisée par la sécrétion d’adhésines et de toxines. L’introduction des vaccins anticoquelucheux a réduit l’incidence de la maladie en Algérie et dans le monde. Malgré une couverture vaccinale, la coqueluche reste une maladie endémique avec une transmission accrue et une faible efficacité clinique pour certains vaccins dus à des différences d’antigénicité et de reproductibilité. L’organisation mondiale de la santé (OMS) recommande l’utilisation de B.pertussis phase I afin de valider l’efficacité des vaccins anticoquelucheux pour la prévention prophylactique. L’objectif de notre étude est d’évaluer le pouvoir protecteur des vaccins anticoquelucheux à germe entier en Algérie par l’estimation de l’activité relative du vaccin et par l’analyse de la réponse immunitaire vaccinale ainsi que la clairance bactérienne induite par la valence coquelucheuse du vaccin DTC, en déterminant le rôle de Bordetellapertussis dans la pathogénèse de la coqueluche. Dans notre étude, cinq souches de Bordetella pertussis (B.p18323/A/99, B.p18323/B/07, B.p18-323/C/12, B.p ATCC 3940 et B.p ATCC9797) ont été étudiées pour la pureté, l’identité bactériologique et l’étude du phénomène de Phase. L’identification moléculaire des souches de B.pertussis Phase I a été effectuée par une PCR et une RT-PCR. La purification des facteurs de virulence des souches Phase I a été réalisée par des méthodes physico-chimiques. La caractérisation biochimique des antigènes de virulence a été réalisée par la technique d’électrophorèse en SDS-Page et des techniques immunochimiques. L’étude de la virulence a été réalisée par une estimation de la charge bactérienne pulmonaire et par détermination de la DL50. L’activité du vaccin anticoquelucheux est estimée par l’épreuve de protection de la souris selon le test de Kendrick. L’analyse de l’immunité vaccinale est étudiée par des techniques Immuno enzymatiques(ELISA)et une quantification de l’expression génétique des cytokines par une Q-RT-PCR. Les résultats obtenus montrent que les souches de B. pertussis (B.p18-323/C/12, B.p ATCC 3940, B.p ATCC9797) ont présenté les caractéristiques type de l’espèce B.pertussis phase I. Lepouvoir pathogène a indiqué des symptômes typiques de la coqueluche. L’étude des facteurs de virulence responsables de la pathogenèse de la coqueluche a montré la présence de la toxine pertussique (PTX), d’Adenyl cyclase Hémolysine (AC-Hy) et la présence d’adhésines type Hémagglutinine filamenteuse (FHA) et du pertactine (PRN). En outre, la synthèse des antigènes de virulence est en corrélation avec les résultats de l’étude moléculaire qui ont montré la présence de gène promoteur BvgsP et la séquence d’insertion IS 481 spécifiques de l’espèce B.pertussis ainsi que la présence de gène de virulence de PT, AC-Hy, FHA, PRN et FIM.Le pourcentage de mortalité des souris et la DL50 moyenne estimée des souches de B.pertussisphase I ont montré une différence significative. La souche de B.pertussis18323/C/12 est classée souche hyper virulente et est utilisée dans cinq essais d’activité d’un lot de vaccin anticoquelucheux à germe entier combinée aux antigènes diphtériques et tétaniques (DTC) destiné pour le PEV en Algérie. L’essai de protection de la souris par le vaccin anticoquelucheux contre l’infection intracérébrale du B.pertussis 18323/C/12 a montré une activité relative conforme aux normes OMS (8,024 UI/dose humaine). L’analyse de la réponse immunitaire chez la souris hyperimmunisée par le vaccin testé a révélé une réponse innée caractérisée par une production du monoxyde d’azote (NO) et d’IL-6 par les cellules immunitaires résidentes (macrophages) et une réponse humorale avec une augmentation de la concentration des anticorps dirigés contre la bactérie inactivée de B.pertussis. L’analyse de la réponse cellulaire a montré une production d’IFN??et d’IL-17A, montrant le rôle des lymphocytes Th (Th1et Th17) dans l’immunit